李书巧¹ , 王坤¹ , 陈开闯¹ , 王凤林¹ , 陈保善^1,2 , 温荣辉^1,2*

1 广西大学生命科学与技术学院, 南宁, 530005; 2 广西大学, 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530005
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 25 篇   
收稿日期: 2019年05月10日    接受日期: 2019年05月17日    发表日期: 2020年05月26日

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本研究通过对 DNA 提取裂解液的成分和用量以及裂解时间等因素进行系统优化，建立了一种高通量的磁珠法提取甘蔗总 DNA，再进行 PCR 检测甘蔗杆状病毒(SCBV)的方法。采用核酸自动提取仪，应用纳米磁珠提取甘蔗总 DNA，经 PCR 检测甘蔗杆状病毒，并与以试剂盒提取 DNA 为模板的 PCR 检测结果进行比较。结果显示，经优化的裂解液成分为 EDTA·Na₂ 0.08 mol/L、NaCl 0.8 mol/L、SDS 2%和 Tris-HCl 0.10 mol/L，裂解时间为 20 min，可用于纳米磁珠提取甘蔗总 DNA 进行 SCBV 检测。所建立的方法通量高、成本低、耗时短，可用于 SCBV 的批量检测。
 

甘蔗杆状病毒；纳米磁珠；PCR 检测；核酸自动提取仪